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【冷知识】冰冻切片常见问题分析
2020-07-22 10:23:15 来源:病理科 作者:梁少姬 浏览:1973

术中快速冰冻切片检查是目前最快速、难度系数最大、医疗安全风险最高的诊断之一,属于临床的紧急会诊。为了降低快速病理诊断的风险,保证其准确性,病理技术人员必须通过专业的技术手段切出一张优良的冰冻切片。下面,由专业的病理技术人员分析一下冰冻切片环节常见的问题、出现问题的原因及其解决方法。


一、组织在染色过程中出现掉片


原因:组织切片过厚、组织质地过硬;蓝化液浓度过高;玻片不洁净等。


解决办法:切片厚度在适度范围内;对于质地较硬组织采用防脱玻片贴片。蓝化液一般选用1%碳酸锂为佳。贴片的玻片采用洁净、新的玻片。


二、细胞核发生严重退变


原因:切片未及时固定,切片在空气中干燥(特别是室温高的情况下退变更为明显);贴片后采用加热(电吹风、加热等方法),切片后加固定液。


解决办法:切片后及时固定。固定液采用甲醇、乙醇为佳,固定时间需在30秒—1分钟左右。


三、组织发脆,导致切片破碎


原因:质地较脆组织较易出现,温度过低、冷冻过度。组织较硬,导致切片困难。


解决办法:调整冷冻切片机箱体温度或冷冻头温度。组织可拿到室温几秒再放回机器内切片、用手摸一下组织切面也会有改善。


四、组织细胞核不容易上色、上色较浅


原因:切片太过于??;苏木精染色时间过短、贴片后采用电吹风加热。


解决办法:常规切片在5um左右。苏木精染色时间以室温的高低来控制。组织贴片后立即固定,且染色之前需要进行水洗。


五、冷冻切片上出现空洞


原因:质地较脆的组织冷冻后初修进刀过快,导致许多组织被带出,紧接这切片就进行贴片。


解决办法:组织初修后切片前5片组织丢弃,第6张贴片进行贴片。


六、切片中冰晶较多影响观察


原因:组织取材过厚;冷冻速度过慢,缓慢的冷冻速度能够使组织间的水分子游离、聚集,然后凝结成冰;切片速度过慢。


解决办法:组织取材不超过0.4cm。应用冷冻锤、速冻头、切记组织托一定要放入切片机速冻台。


图片1.png

优良的冰冻切片



综上所述,一张优良的冰冻切片必需切片完整、厚薄均匀、无皱褶、无刀痕、无冰晶;染色核浆分明、红蓝适度;细胞结构清晰、无人为退变。



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